Moleküler Patolojide Genetik Tanı Teknikleri; Gerçek Zamanlı Polimeraz Zincir Reaksiyonu (Real-time Pcr)
Anahtar Kelimeler
Patoloji bilimi gelişimini, hastalıkların canlı vücudunda meydana
getirdiği değişiklikleri klinik bulgularla beraber ele alıp, hastalıkların
tanımlanmasına yardım eden otopsi ile sağlar. Kullanılan aletlerdeki,
metotlardaki ve kimyasallardaki ilerlemeler ile bu gelişimine devam eden bir
bilim dalıdır. Halen gelişim gösteren bu disiplinin merkezinde biyokimya, hücre
biyolojisi, moleküler biyoloji ve genetik alanında geliştirilen klasik ve yeni
tekniklerin patolojik süreçlerin değerlendirilmesine uygulanması yer
almaktadır. Günümüzde ise makroskopi ile başlayan serüvenini moleküler düzeyde
yapılan analizler ile sürdürmektedir. Moleküler teknikler içerisinde Nükleik
Asit Hibridizasyonu’na veya Nükleik Asit Amplifikasyonu’na dayalı teknikler
kullanılmakla birlikte her birinden alınacak sonuçlar çeşitli çalışmalara cevap
oluşturmaktadır. Bu tekniklerin kullanımı canlı vücudunda bulunan nükleik
asitlerin ve bunların oluşturduğu, nesilden nesile aktarılan genetik kodlamanın
başrolleri olan DNA, RNA ve proteinin kullanılması esasına dayanmaktadır. DNA’nın nesilden nesile aktardığı özellikleri genetik kodlama ile nasıl
yaptığı sorusunun sorulması onun hücre içindeki davranışının çözülmesini
sağlamıştır. Bu sayede DNA’nın hücre içi koşulları in vitro ortamlarda
oluşturulup tek bir tüpte, bir gen yada spesifik bir DNA dizisinin çok sayıda
kopyasının elde edilmesi sağlanmıştır. Bu gelişim rekombinant DNA yöntemleri
ile DNA klonlanması akabinde de Polimeraz Zincir Reaksiyonu tekniğinin
bulunmasıyla devam etmiştir. Polimeraz Zincir Reaksiyonu (PCR), kendisinden
önce ve sonra geliştirilen birçok moleküler metodun temelini oluşturan, hem
teşhis hem de epidemiyolojik çalışmalarda en çok kullanılan sensitif ve
spesifik özelliği yüksek moleküler metot olmuştur. Polimeraz Zincir
Reaksiyonu’nun temelini oluşturduğu moleküler teknikler içerisinde Real-Time
PCR tekniği nükleik asit amplifikasyonu ile beraber eş zamanlı bir şekilde
artış gösteren floresan sinyali ölçülmesiyle kantitatif sonuç elde edilen bir
yöntem olmuştur.
Bu kitabın bölümleri bulunmamaktadır.
Atıf Sayısı :