Son yıllarda, iltihaplanma ve kanser oluşumunun moleküler temeli hakkındaki anlayışımızdaki ilerlemeler, araştırmacılara yeni ilaç hedefleri sunmuştur. Son yıllarda tanımlanan birçok yeni hücre, iltihaplanma, bağışıklık gibi immüniteye katılan hücreler, doğal öldürücü hücreler (ILC'ler), düzenleyici T lenfositler (Tregs) gibi, ve birçok hastalıktaki çeşitli ilişkili sitokinlerin önemli rolleri takdir edilmekte ve daha önce belirsiz olan patojenez mekanizmalarının aydınlatılmasına yardımcı olmaktadır. Mevcut gelişmiş biyomühendislik teknikleri sayesinde, daha etkili ilaçlar sürekli olarak klinik kullanıma girmektedir, bunların en popüler olanı yapay olarak elde edilen monoklonal antikorlar, yani \"biyolojikler\"dir.Dermatolojide Biyolojikler\"Biyolojikler\" terimi, yaşayan hücreler tarafından sıkı biyoteknolojik müdahalelerle üretilen monoklonal antikorları tanımlar. Bunlar, César Milstein ve Georges J. F. Köhler tarafından icat edilen \"hibridoma teknolojisi\"nin sonucudur. Bu teknoloji, günümüzde araştırmacıların seçilmiş antijenik hedeflere karşı çok spesifik antikorlar üretmelerine olanak tanır. Bu antikorlar, hücresel reseptörler, interlökinler veya antikorlar gibi yaşayan dokulardaki doğal proteinleri taklit etmek veya inhibe etmek için tasarlanmıştır.Bu tür moleküllerin oluşturulması, bir antikor üreten B hücresi ile hipoksantin-guanin fosforibozil-transferaz genine sahip belirli bir miyelom hücre hattının klonal hücrelerinin birleştirilmesini gerektirir. İlk adım, laboratuvar hayvanı, tercihen farelerin, tekrarlayan enjeksiyonlarla ilgi duyulan antijene maruz bırakılması ve enjekte edilen antijene karşı antikor üretimi de dahil olmak üzere bağışıklık yanıtı geliştirmelerini sağlamaktır. Farelerin immünizasyonundan sonra, dalaklarından splenositler izole edilir ve miyelom hücreleri elektrofuzyon yöntemiyle ölümsüzleştirilmiş miyelom hücreleriyle birleştirilerek \"hibridoma\" hücreleri elde edilir. Bu hibrit hücreler daha sonra 10-14 gün süreyle hipoksantin-aminopterin-timidin (HAT) ortamına yerleştirilir. Aminopterin tarafından nükleotid sentezi yollarının bloke edilmesi nedeniyle, birleşmemiş miyelom hücreleri ölür ve bu füzyon yoluyla nükleotid sentezleme yeteneği kazanan birleşmiş miyelom hücreleri hayatta kalır. Bu hayatta kalan hücreler ölümsüz olup antikor üretebilirler. Prosedürün son adımı, uygun antikoru üreten hücreleri tanımlamaktır. İnkübe edilmiş hücreler, seyreltme yapıldıktan sonra çoklu kuyu plaklarının kuyularına dağıtılır. Dağıtım, her kuyunun yalnızca bir hücre içermesini sağlayacak şekilde düzenlenir, böylece monoklonal antikorlar \"ayrı kuyularda\" toplanabilir. Daha sonra, her kuyudaki hibridoma hücreleri, beklenen antikor-antijen reaksiyonunu görselleştirmek için bir enzimle işaretlenmiş antijen ve bir kromojenik substrat ile inkübe edilir.(AI)
Atıf Sayısı :